唐楠 , 吴军 , 唐道城

青海大学高原花卉研究中心, 青海省园林植物与观赏园艺重点实验室, 西宁, 810016
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 35 篇   
收稿日期: 2017年07月05日    接受日期: 2017年07月24日    发表日期: 2017年08月08日

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本实验以产于四川、安徽、广东和青海的白芥农家品种为材料，采用单因素筛选和L₁₆ (4⁵)正交设计相结合的方法，对白芥ISSR-PCR反应体系的Mg²⁺浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶和模板DNA用量进行优化，建立最佳的白芥ISSR-PCR反应体系。结果表明：在20 μL的PCR反应体系中，Mg²⁺浓度2.0 mmol/L、dNTPs浓度0.5 mmol/L、TaqDNA聚合酶0.2 U、引物浓度0.4 μmol/L、模板DNA 60 ng为最佳用量。用4个白芥农家品种对建立的ISSR-PCR反应体系进行验证，表明该反应体系稳定性高、可重复性好，同时筛选出条带清晰、多态性较好的18条引物。该反应体系的建立为白芥ISSR标记开发、种质资源鉴定与筛选、遗传多样性分析和分子标记辅助育种等奠定了基础。

白芥；分子标记；简单序列重复区间；体系验证